domingo, 30 de marzo de 2014

Determinación de hemoglobina


SIGNIFICADO CLINICO
La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada de transportar el oxígeno por la sangre de los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o hemorragias. Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, deshidratación o estancias en lugares con altitud. El diagnostica clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.
Material.
·         2 Cubetas para espectrofotómetro.
·         Gradilla.||
·         Pipeta.
REACTIVO/MUESTRAS.

·         Cianuro.
·         Sangre con anticoagulante.
·         Reactivo blanco.
Equipo de laboratorio.
·         Espectrofotómetro.
PROCEDIMIENTO.
1.       Condiciones del ensayo:
Longitud de onda…………………..540 nm.
Cubeta…………………………..1 cm de paso.
Temperatura……………………….15-25 Grados C.
2.       Ajustar espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
3.       Pipetear:
a)      METODO MACRO.        
 
BLANCO
PATRON
MUESTRA
RT(ML)
5.0
5.0
5.0
CALIBRADOR(µL)
 
20
 
MUESTRA(µ
 
 
20

b)      METODO MICRO.
 
BLANCO
PATRON
MUESTRA
RT(ML)
2.5
2.5
2.5
CALIBRADOR(µL)
 
10
 
MUETRA(µL)
 
 
 
4.       Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25ºC).
5.       Leer la absorbancia (A) del calibrador y la muestra frente al Blanco del reactivo.

Cálculos:
-         Con factor2 
(A)Muestrax36.77=g/dL de hemoglobina en la muestra.
- Con Patrón:
(A) muestra/(A)Patron x15 (conc. del patron) = d/dL de Hb en la muestra.
 Resultado= 
Muestra numero 1. 15.22 d /dL
Muestra numero 2. 16.5  g/dL

Conclusión:
Gracias a esta práctica hemos determinar cuantos gramos de hemoglobina hay por dl de sangre que es lo que seria la concentración de esta en la sangre y, así mismo, uno podría determinar conatos gramos de hemoglobina hay en esta persona.

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