Prueba para la detección de la hormona HCG en Tira

Prueba para la detección de la hormona HCG en Tira

RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA

La hormona gonadotropina crónica (hCG) es una hormona glicoprotéica sintetizada por la placenta y detectable en la sangre y en la orina de manera temprana después de la implantación de un ovulo fertilizado en el tejido crónico .Es la señal principal y el marcador especifico que existe embarazo. El uso de anticuerpos monoclonales en la sub-unidad Beta de hCG es un importante avance que proporciona la posibilidad de fabricar una nueva generación de inmunoensayos con especificidad consistente y alta sensitividad para detectar hCG.

Materiales requeridos pero no provistos

1.       Contenedor para la toma de muestra

2.       Controles positivos y negativos comercialmente disponibles

3.       Centrifuga con capacidad de 1000g (para los casos que desee centrifugar muestras de sangre total y llevar a cabo la prueba con suero)

PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA

Metodo 1:

1.-Sumerjea la tira en la muestra de orina o suero.Asegurese que el nivel de la muestra esté por debajo de la línea denominada “MAX”.

2.-Coloque la tira en una superficie plana tan pronto la muestra absorbida empiece a correr en la membrana (usualmente tard de 4 a 8 segundos).

3.-Espere para llevar acabo la interpretación de los resultados.

Metodo 2:

Coloque la tira en una superficie plana y limpia, con la flecha apuntando hacia la persona que lleva acabo la prueba.

1.- Coloque 3 o 4 gotas de muestra de orina o suero en el cojin de absorción por debajo de la línea denominada “MAX”

2.-Espere para llevar acabo la intrpretacion de los resultados.

Metodo 3:

1.- Coloque en un rack un tubo de ensayo con suficiente muestra de orina o suero teniendo en consideración que el nivel de muestra se mantenga por debajo de la línea de la prueba denominada “MAX

2.- Introduzca la tira en un tubo de ensaye

3.- Espere la interpretación de resultados

Interpretación de resultados

1.       Resultado POSITIVO
Adicionalmente a la línea rosada-rojiza de la zona de control aparecerá otra línea en la zona de test. El tiempo óptimo para observación es de 2.5 a 3 minutos. Sin embargo, un resultado positivo puede surgir a partir de 1 segundos de transcurrida la prueba

2.       Resultado NEGATIVO

Solamente una línea rosada-rojiza aparecerá en la zona de control y NADA en la zona de test

3.       Resultado INVALIDO

      Después de 90 segundos no aparecen líneas en la zona de test ni en la zona de control ó únicamente una línea en la zona de test. Esta prueba deberá excluirse. Lo anterior puede deberse a que se llevaron a cabo pasos de manera inapropiada en el procedimiento de la prueba ó simplemente al deterioro de los reactivos. En dicho caso la muestra deberá ser evaluada con otra nueva Tira.

Practica de Biomoleculas

Biomoleculas

En esta actividad aplicaras la metodología para comprender y resolver problemas de su entorno, utilizando las ciencias experimentales, además de que seguirás normas de seguridad cuando uses y manejes sustancias, instrumentos y equipos en el laboratorio de química y biología.

Introducción

Entre los compuestos fundamentales de la materia viva de las células encontramos los carbohidratos, lípidos y proteínas; por esta razón, los alimentos que consumen todos los heterótrofos, incluido el ser humano, deben contener necesariamente esta macromoléculas.

Mediante el uso de pruebas químicas sencillas se pueden identificar en los alimentos la presencia de estas macromoléculas.

Materiales:                                                                               Sustancias

·         10 tubos de ensayo                                       Reactivo de fehling

·         1 gradilla                                                       Ácido clorhídrico al 50%

·         2 vasos de precipitados de 100ml                Lugol (solución alcohólica de yodo

·         1 agitador                                                     

·         2 pinzas para tubo                                         Para proteínas:

·         1 mechero Bunsen                                        Reactivo de Biuret

·         1 gotero                                                         Ácido nítrico concentrado

·         1 pliego de papel estraza                              Hidróxido de amonio concentrado

Muestras de alimento

·         Harinas (trigo)

·         Frutas (manzana)

·         Verduras (zanahorias)

·         Carnes (hígado de pollo)

·         Lácteos (queso)

·         Semillas (haba)

De preferencia que los alimentos estén hervidos, a excepción de las frutas.

Trabajaras con cantidades suficientes para que alcances a observar las reacciones, pero que no pongan en riesgo su integridad física.

Procedimiento:

1.- Prueba de Lugol (se utiliza para identificar almidones)

* Coloca una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo

* Agrega dos gotas de Lugol

* Observa el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol

* Repite la prueba por lo menos con 5 alimentos diferentes

* anota los resultados en la tabla

Si la muestra contiene almidón, con el Lugol adquirirá una coloración azul oscuro (prueba positiva); si no, tomará el color ámbar del reactivo (prueba negativa).

Los residuos contienen almidones y yoduros, que de acuerdo con las normas ecológicas ECOL se pueden verter directamente en el desagüe.

2.- Prueba de Fehling (se utiliza para identificar azucares reductores)

* Agrega 0.5 de solución de Fehling A y 0.5 ml de Fehling B a una pequeña porción de muestra colocada en el tubo de ensaye.

* Agrega 2 ml de agua si la muestra es sólida.

* Caliente a ebullición por 2 minutos, cuidado que la muestra no se proyecte. El calentamiento puede realizarse en baño maría, y la boca de los tubos debe estar dirigida donde no haya personas.

* Observa el color de la reacción y anota los resultados en el cuarto.

* Repite la prueba por lo menos con 5 alimentos diferentes. Puedes preparar todos los tubos y meterlos juntos al baño maría.

Si la muestra contiene azucares reductores, al reaccionar con el reactivo de Fehling se formara un precipitado de café rojizo (prueba positiva); si no, la muestra queda de color azul del reactivo (prueba negativa).

Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor de plástico para su tratamiento o almacenamiento temporal, hasta que pueda desecharse.

Reacciones para identificar proteínas

1.- Prueba de Biuret (se utilizan para identificar proteínas y polipeptidos, no menores de tres muestras aminoácidos, en solución o al estado sólido)

* Agrega 1 ml de reactivo de Biuret a una pequeña porción de muestra colocada en cada tubo de ensayo.

* Observa la coloración que toma la muestra.

* Anota los resultados en el cuadro.

* Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes.

Si en la muestra hay proteínas se observará que la muestra toma una coloración violeta o morada (prueba positiva); si se queda de color azul, quiere decir que en la muestra no hay proteínas (prueba negativa).

Los residuos contienen cobre, por lo que la parte liquida debe colocarse en un contenedor de plástico para su tratamiento o almacenamiento temporal, hasta que pueda desecharse.

2.- Reacción xantoproteica (se utiliza para identificar proteínas que contienen aminoácidos aromáticos).

a) Agregar 1 ml de ácido nítrico concentrado a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, calienta con precaución, sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye, y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución, y dirigiendo la boca del tubo hacia donde haya personas. Puedes calentarlos en baño maría. Espera que se enfrié.

b) Deja resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio (no respires los vapores) sin agitar, de tal forma que se formen dos capas.

c) Anota los resultados en el cuadro.

d) Repite la prueba en por lo menos 5 alimentos diferentes

Si en la muestra hay proteínas, se formará un anillo de color naranja entre las capas formadas por el ácido y el hidróxido (prueba positiva).

Los residuos contienen un ácido y una base, por lo que mezclan con mucho cuidado las dos capas para que ambas soluciones se neutralicen y puedan desecharse.

Resultados

Alimentos		Carbohidratos		Proteínas
		Lugol	Fehling	Biuret	Xantoproteica
1	Queso panela	-	N/A	-	+
2	Haba	-	N/A	-	+
3	Trigo	-	N/A	-	+
4	Zanahoria	-	N/A	-	+
5	Hígado	-	N/A	-	+

Evidencias